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顯微鏡百科丨神秘光學顯微鏡

時間: 2020-12-10 09:51 編輯: 北京瑞科中儀閱讀:

光學顯微鏡涵蓋范圍廣,應用種類多,除了我們在常研究中提及到的幾款類型顯微鏡外,光學顯微鏡還可以細分為很多不同使用方法和原理的顯微鏡,因為很少提及,所以尤為神秘。
顯微鏡百科丨神秘光學顯微鏡
雙光子熒光顯微鏡是結合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發技術的一種新技術。雙光子激發的基本原理是:在高光子密度的情況下,熒光分子可以同時吸收 2 個長波長的光子,在經過一個很短的所謂激發態壽命的時間后,發射出一個波長較短的光子;其效果和使用一個波長為長波長一半的光子去激發熒光分子是相同的。雙光子激發需要很高的光子密度,為了不損傷細胞,雙光子顯微鏡使用高能量鎖模脈沖激光器
顯微鏡百科丨神秘光學顯微鏡 
雙光子熒光顯微鏡有很多優點:長波長的光比短波長的光受散射影響較小,容易穿透標本;焦平面外的熒光分子不被激發,使較多的激發光可以到達焦平面,使激發光可以穿透更深的標本;長波長的近紅外光比短波長的光對細胞毒性;使用雙光子顯微鏡觀察標本的時候,只有在焦平面上才有光漂白和光毒性。所以,雙光子顯微鏡比單光子顯微鏡更適合用來觀察厚標本、更適合用來觀察活細胞、或用來進行定點光漂白實驗。
顯微鏡百科丨神秘光學顯微鏡
全內反射熒光顯微鏡是利用光線全反射后在介質另一面產生衰逝波的特性,激發熒光分子以觀察熒光標定樣品的極薄區域的一款新型顯微鏡。其觀測的動態范圍通常在200 nm以下。因為激發光呈指數衰減的特性,只有極靠近全反射面的樣本區域會產生熒光反射,大大降低了背景光噪聲干擾觀測指標,故此項技術廣泛應用于細胞表面物質的動態觀察。該顯微鏡信噪比高,分辨率高,對生物樣本的損傷小,可進行活體物質的研究和單分子的動態研究。
全內反射熒光顯微鏡正是憑其獨特的優勢,從而成為研究細胞表面科學如生物化學動力學,單分子動力學的最有前途的光學成像技術,F在全內反射熒光顯微技術已被廣泛應用于:實時觀察單個肌漿球蛋白分子的運動;單個蛋白分子對之間的熒光共振能量轉移:聚合物單個分子的結構變化;生物質膜附近的神經分泌腺的顆粒運動等。全內反射熒光顯微術的發展一方面會在加強傳統優勢的基礎上,即動態觀察生物大分子的結構,相互作用,物質的分泌,同時在不斷地改進物鏡和CCD相機的性能基礎上進一步同其他儀器的結合,更多的用在生物細胞活體方面的研究。

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